Если по характеру патологического материала (например, при посеве ткани) или по другим условиям невозможно применить обработку трехзамещенным фосфорнокислым натрием, то материал обрабатывают 2% стерильным водным раствором серной кислоты (примерно в равном объеме) в течение 15-20 минут, включая центрифугирование. Кислоту сливают и осадок засевают на 3-4 пробирки яичной среды. Применяется и обработка патологического материала 47о раствором кристаллического едкого натра в равном объеме. Затем обработанный материал помещают в термостат при 37° на 60 минут, в течение которых несколько раз встряхивают, затем центрифугируют 15 минут, осадок нейтрализуют 1-2 каплями 5% раствора соляной кислоты и засевают на 3-4 пробирки. Обработка материала с использованием для посева пены (М. Б. Мазур, 1936) и осадка. Материал обрабатывают 2% раствором серной кислоты, примерно в равном по отношению к материалу объеме. Хорошо перемешанный с кислотой материал переливают в широкую пробирку и в течение 4-5 минут энергично встряхивают для получения пены, которую засевают на 2 пробирки яичной среды. Посев производят петлей, закрученной в несколько оборотов в виде ракетки. После снятия жидкость центрифугируют и осадок, с помощью петли засевают также на 2-3 пробирки. Время контакта материала с кислотой в общей сложности всех манипуляций (т. е. с момента соединения материала с кислотой и до посева осадка) не должно превышать 20 минут. Флотация производится по описанной выше методике. Флотационное кольцо снимают пастеровской пипеткой в стерильную пробирку. К снятому кольцу добавляют примерно равное количество 2% раствора серной кислоты, смесь тщательно встряхивают и оставляют на 10 минут, после чего на поверхности снова образуется кольцо, которое полностью используется для посева на 2-3 пробирки яичной среды. Посев производят петлей-ракеткой. Посев на плотные питательные среды производят пастеровской пипеткой или петлей и легкими движениями последний материал втирают в поверхность питательной среды.